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蛋白质纯化的一般注意事项

更新时间  2021-07-03 00:30 阅读
本文摘要:蛋白质提纯的一般常见问题 在展开一切一种蛋白质提纯得情况下,必须時刻注意保证 它的稳定,维护保养它的特异性,有一些规范化的常见问题务必铭记,他们还包含: 1、作业者尽可能放置冰面或是在冻库内展开。2、不必过度熟,蛋白浓度值维持在μg/mL~mg/mL。 3、合适的pH,除非是是展开讨论层析,所用以的缓冲溶液pH避免 与pI完全一致,防止蛋白质的融解。

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蛋白质提纯的一般常见问题 在展开一切一种蛋白质提纯得情况下,必须時刻注意保证 它的稳定,维护保养它的特异性,有一些规范化的常见问题务必铭记,他们还包含: 1、作业者尽可能放置冰面或是在冻库内展开。2、不必过度熟,蛋白浓度值维持在μg/mL~mg/mL。

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3、合适的pH,除非是是展开讨论层析,所用以的缓冲溶液pH避免 与pI完全一致,防止蛋白质的融解。4、用以蛋白酶抑制剂,防止蛋白酶对总体目标蛋白的水解;在提纯体细胞中的蛋白质时,重进DNA酶,水解DNA,防止DNA对蛋白的环境污染。5、避免 试品反复冻融循环和轻度摇晃,避免 蛋白质的转性。

6、缓冲溶液成份尽量模拟仿真体细胞细胞外液。7、在缓冲溶液中重进0.1~1米mol/L DTT(或β-巯基乙醇),防止蛋白质的水解。8、特1~10mmol/L EDTA金属材料抗氧化剂,防止重金属超标对总体目标蛋白的损坏。

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9、用以消毒杀菌水溶液,防止微生物菌种生长发育。


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